移液陷阱大全，天天實(shí)驗(yàn)卻沒注意到的這些細(xì)節(jié)！
實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重現(xiàn)性，對(duì)于科研工作者的重要性是不言而喻的。在實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中，有時(shí)候明明是相似的實(shí)驗(yàn)過(guò)程，卻因?yàn)橐恍┦е晾宓恼`差，讓結(jié)果差之千里。
其中很大一部分原因來(lái)自于我們幾乎每天都要使用的移液器，“正確使用移液器”聽上去像是每個(gè)實(shí)驗(yàn)人員早已學(xué)會(huì)的基本操作，但實(shí)際上由于移液失誤造成誤差的情況數(shù)不勝數(shù)。
道理很簡(jiǎn)單：
那些習(xí)以為常的事物，往往會(huì)成為最容易被忽略的疏漏之處！
今天就讓我們回到最初的樣品處理過(guò)程，來(lái)審視自己是否避開了每一步的陷阱。不論你是移液新手，還是用“槍”大師，都值得收藏這一篇事無(wú)巨細(xì)的操作指導(dǎo)！
我們的目標(biāo)是：用好移液器，每天不加班！
組成精準(zhǔn)的移液系統(tǒng)
一，挑選合適的吸頭
吸頭作為實(shí)驗(yàn)室常用的一次性耗材，其重要性常常被忽視。
低質(zhì)量的吸頭不僅會(huì)存在殘留污染物到樣品中的風(fēng)險(xiǎn)，而且還會(huì)影響到移液系統(tǒng)的密封性以及精準(zhǔn)性。反之，高質(zhì)量的吸頭具有光滑無(wú)瑕疵及高度的均一性，如此才能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重現(xiàn)性。
二，選擇合適量程的移液器
移液器最大量程的30%-100%是推薦適用范圍，在移液時(shí)，吸頭內(nèi)的空氣柱體積越小，誤差越低。
假如實(shí)驗(yàn)中需要移取的液體體積為100μL，小E會(huì)推薦選擇10-100μL量程的移液器，如下圖所示，雖然不同量程的移液器都可用于移取100μL，但準(zhǔn)確度和精準(zhǔn)度差異會(huì)很明顯。
三，刻度調(diào)節(jié)有玄機(jī)
在刻度調(diào)節(jié)時(shí)，從大量程調(diào)節(jié)至小量程，精度最佳；從小量程調(diào)節(jié)至大量程，最好先調(diào)至略大一點(diǎn)，再返回。
四，移取液體小竅門
01.保證垂直吸液，根據(jù)流體靜力壓原理，移液器斜著吸液將使體積偏大。
02.吸頭盡量浸沒得淺一些，防止液體殘留在吸頭表面；但是同時(shí)要浸沒得足夠深，防止吸取空氣，下表是針對(duì)不同量程移液器建議的浸沒深度。
03.至少預(yù)潤(rùn)濕3次，使得空氣柱充滿飽和的液體分子（特別是在移取易揮發(fā)性液體時(shí)），可最大限度降低空氣柱帶來(lái)的誤差。如下圖所示，在100μL的移液中，第一次和第二次移液體積偏小，3次以上，移液體積越來(lái)越接近設(shè)定體積。
04.吸、放液體應(yīng)該緩慢、勻速，以提高移液精準(zhǔn)性。因此推薦大家使用電動(dòng)移液器，電動(dòng)馬達(dá)驅(qū)動(dòng)，減少人為誤差，提高精準(zhǔn)度。
05.吸取液體后稍稍停留一會(huì)兒（特別是對(duì)于大量程移液器），此處小E溫馨提醒，不用擔(dān)心漏液，好的移液系統(tǒng)是不存在漏液?jiǎn)栴}的（小E驕傲臉）
五，合適角度打出液體
成功完成精準(zhǔn)移液
放液時(shí)注意吸頭尖端靠在容器內(nèi)壁，特別是對(duì)于20μL以下的體積尤為重要。
移液器角度為20°～45°，體積低于10μL直接放液到容器底部。
如果按照操作做到了這里，那么恭喜你！這是精準(zhǔn)移液的最后一步，相信用槍高手如你掌握角度一定早已游刃有余，完成這一步，收獲完美結(jié)果！
