重磅!德爾塔病毒也有了標準品,檢測將進一步加快!
近期,新冠病毒德爾塔(Delta)變異株在國內(nèi)的跨省傳播引發(fā)高度關(guān)注。事實上,該病毒在全球范圍內(nèi)已經(jīng)傳播了很長時間。德爾塔變異株病毒載量高、傳播能力強、傳播速度快、轉(zhuǎn)陰時間長。自2020年10月首次在印度出現(xiàn)以來,11個月的時間內(nèi)已擴散至全球132個國家地區(qū),導(dǎo)致多國新冠病例激增,對未接種疫苗人群的健康和全球經(jīng)濟復(fù)蘇產(chǎn)生嚴重影響。(聯(lián)合國7月30日數(shù)據(jù))
面對“來勢洶洶”的德爾塔病毒,甚至今后依然還有可能出現(xiàn)疫情,也對防控措施提出了新要求——要更加快、狠、嚴、擴、足。
雖然整體防控局勢不容樂觀,但我國目前已然建立起十分完善的病毒檢測機制,即便是再強悍的病毒,在完善的檢測機制面前,也會無所遁形。
接下來艾本德就帶大家來看看,面對德爾塔的侵襲,我國是如何有條不紊進行檢測工作的吧!
快速響應(yīng),開發(fā)標準物質(zhì)
快字當頭,天下武功唯快不破。對于檢測來說也是如此。
要做到快,首先需要有標準品作為參考,如此才能快速地開發(fā)出相應(yīng)的試劑盒,并且做到準確。
近期有報道國家計量院在德爾塔毒株疫情全球蔓延的情況下,快速響應(yīng),開發(fā)出了針對新型冠狀病毒德爾塔(B.1.617.2)突變株基因組RNA標準物質(zhì)。
有了突變株的標準物質(zhì)以后,我們在建立熒光定量PCR體系時就有了標尺,通過絕對定量的方法我們可以進行比較精確的病毒拷貝數(shù)測定,相比于沒有標準品的情況,醫(yī)務(wù)工作者在判定病人的病毒感染的情況會有更加準確的數(shù)據(jù)作為依據(jù)。
標準品在試劑盒開發(fā)過程中的重要性
病毒株標準品在試劑盒開發(fā)和驗證的過程中同樣扮演了至關(guān)重要的角色。
有了標準品基于不同方法學(xué)建立起來的病毒檢測體系,如定量PCR、數(shù)字PCR或者等溫擴增方法之間可以進行檢測準確度、檢出限(LOD)以及特異性的比較,對于同一種方法不同廠家的試劑盒也可以進行之間的比較。
這些比較除了判定一個試劑盒檢測能力強弱之外,對于醫(yī)務(wù)工作者來說,在采用某種試劑進行檢測時,這些比較也會對產(chǎn)生假陰性或者假陽性的情況有著更好的提示作用。
當然檢測環(huán)節(jié)除了有標準品作為標桿外,對標準品如何進行操作,會在很大程度上影響到檢測結(jié)果的準確度。
一般來說,標準品的濃度都是比較高的,在使用時需要涉及到跨度巨大的稀釋工作。
標準品操作涉及到大量的移液過程,而移液對實驗結(jié)果的準確性和可重現(xiàn)性的影響則是巨大的。
01
如何更精準地移液?
通常來說我們在稀釋時會將較小體積的母液加入到較大體積的稀釋液中,移液體積的準確性至關(guān)重要,微小的移液體積誤差都會在后續(xù)的稀釋過程中成倍放大。
想要更加精準地移液,除了操作人員的移液技能之外,使用電動移液器也是一個提升效率和準確度的方式。
電動移液器吸放液操作完全由電動馬達來控制,速度恒定且可調(diào),停點準確,能夠輕松避開了手動移液產(chǎn)生的誤差,從而提升實驗的精準度和結(jié)果的可重現(xiàn)性。

02
手工吹打VS電動移液器程序設(shè)定
另外移液過程中我們要保證母液完全進入稀釋液中,那么放液之后的吹打混勻就變得必不可少。
手工吹打每次力量不同次數(shù)不同,效果也是因人而異,還有可能因為回吸過快污染了移液器的腔體,電動移液器設(shè)定好吸放液速度與次數(shù),每次混勻一鍵搞定,而且重復(fù)性更好。

03
多道電動移液器提升實驗通量
而對于更高通量的需求,艾本德提供電動款Xplorer®/Xplorer®plus 8、12-通道移液器,大大提升96孔板的移液效率。

確保了移液的準確性后,在稀釋工作中,我們也需要考慮到標準品的特性,避免可能會出現(xiàn)的降解。
對于本次德爾塔毒株的RNA標準品來說,RNA在有RNase存在的情況下非常容易降解。所以我們建議采用不含RNase的耗材來進行操作,Eppendorf的PCR潔凈級別的耗材便是一個非常好的選擇。耗材不含RNase,可以有效避免在移液和操作過程中發(fā)生降解。
此外,我們建議使用ep Dualfilter T.I.P.S®雙濾芯吸頭,可有效阻斷近100%的氣溶膠和生物分子,為實驗人員提供安全保護。

此外,對于有條件的實驗室,也可以選擇將以上實驗流程全自動化。
Eppendorf epMotion®系列工作站,可以全自動地完成標準品的稀釋與分裝工作,此外還能全自動地完成定量PCR體系構(gòu)建工作,可以極大地提升實驗室的工作效率和實驗室的通量。

