植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備配置清單
組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與其他一般實(shí)驗(yàn)室工作的主要區(qū)別在于要求保持操作,避免微生物及其他有害因素的影響。其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境要求也有所不同,今天東南儀誠(chéng)為大家介紹植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的常用儀器配置清單和實(shí)驗(yàn)室的基本操作。一、
植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)成
組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室布局的總體要求:便于操作、便于滅菌、便于觀察
完整的組織培養(yǎng)室通常包括洗滌室、準(zhǔn)備室(化學(xué)實(shí)驗(yàn)室)、接種室、培養(yǎng)室、細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室等部分??梢愿鶕?jù)實(shí)際需要和條件進(jìn)行設(shè)計(jì)。
但從功能上至少包括準(zhǔn)備室(化學(xué)實(shí)驗(yàn)室)、接種室以及培養(yǎng)室三部分,并且按順序排列。在準(zhǔn)備室與接種室之間應(yīng)留有緩沖空間(或建立緩沖室)。
(一)準(zhǔn)備室(化學(xué)實(shí)驗(yàn)室)
1、主要功能
用于培養(yǎng)器皿的清洗、干燥、培養(yǎng)基的配制、分裝和滅菌、試管苗的出瓶及整理等工作。
2、主要儀器設(shè)備及用品
?。?)藥品柜、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、水槽
?。?)清洗儀
?。?)涼干架
?。?)干燥箱
?。?)各種玻璃器皿(燒杯、量筒、容量瓶、試劑瓶、三角瓶等)
(6)蒸餾水制造裝置
?。?)天平(萬(wàn)分之一)
?。?)移液器
?。?)pH計(jì)(不同范圍pH試紙)
(10)水浴鍋
?。?1)微波爐
(12)電爐
?。?3)磁力攪拌器
?。?4)蠕動(dòng)泵及培養(yǎng)基分裝用品
?。?5)高壓滅菌鍋
?。?6)冰箱
接種室(
1、功能
接種材料的滅菌、接種以及培養(yǎng)物的繼代轉(zhuǎn)接等。
接種室要求保持潔凈,與化學(xué)實(shí)驗(yàn)室之間應(yīng)設(shè)置緩沖室。
2、主要儀器設(shè)備及用品
?。?)工作臺(tái)
?。?)紫外燈
(3)小推車(chē)
?。?)擱架
(5)瓷盤(pán)
?。?)接種工具
各種鑷子、解剖刀、普通剪刀、接種針、酒精燈、手持噴霧器、細(xì)菌過(guò)濾器等。
(三)培養(yǎng)室
1、功能
主要用于植物材料的培養(yǎng)。
要求室內(nèi)潔凈并能保持溫度、光照以及濕度,以促進(jìn)植物材料的生長(zhǎng)和分化。
2、主要儀器設(shè)備及用品
?。?)培養(yǎng)架及燈管
?。?)搖床(振蕩器)
(3)空調(diào)
?。?)自動(dòng)定時(shí)器
(5)加濕及除濕器
?。?)光照培養(yǎng)箱
?。ㄋ模┘?xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室
1、功能
主要用于培養(yǎng)材料的顯微觀察及照相等。
2、主要儀式設(shè)備及用品
體視顯微鏡、普通顯微鏡、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡、配套顯微照相裝置、普通相機(jī)或數(shù)碼相機(jī)、切片機(jī)及配套制片及染色用品等。
體視顯微鏡用途:放大倍數(shù)5~80倍主要用于植物形態(tài)分化的觀察、莖尖的切取。
普通光學(xué)顯微鏡用途:用于植物切片觀察,確定植物的發(fā)育進(jìn)程,如:不定芽、不定胚的分化過(guò)程以及其它器官組織的分化等。
倒置顯微鏡用途:主要用于細(xì)胞、細(xì)胞團(tuán)形成的觀察。
二、
實(shí)驗(yàn)室基本操作
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1、普通器皿∶采用洗衣粉、洗潔精等中性洗滌劑洗滌。
2、難清洗器皿及移液管等∶用水清洗后再用洗液浸泡,后清水沖洗,
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滅菌是指用物理和化學(xué)方法消滅物體表面和內(nèi)部的所有微生物(包括芽胞),使之呈無(wú)菌狀態(tài)。經(jīng)過(guò)滅菌的物品稱(chēng)“”。
1、器具滅菌:培養(yǎng)皿、解剖刀、鑷子等用品。
?。?)干熱滅菌:鋁箔包好后,放于恒溫干燥箱內(nèi),150℃保溫2小時(shí),成本較高。
(2)高壓蒸汽滅菌:高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)120℃15-20分鐘。
?。?)灼燒滅菌:接種時(shí),解剖刀及鑷子等浸入95%,然后取出在酒精燈火焰上灼燒殺菌。
2、培養(yǎng)基滅菌
采用高壓蒸汽滅菌。120℃15-20分鐘。
培養(yǎng)基體積越大,滅菌時(shí)間越長(zhǎng)。
3、材料的滅菌
采用過(guò)濾滅菌,如IAA、ZT、等。
4、外植體的表面滅菌
?。?)流水沖洗10-20分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間
(2)70-75%酒精中浸泡30秒
?。?)蒸餾水沖洗4-5次
?。?)備用
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實(shí)驗(yàn)員消毒、實(shí)驗(yàn)室、→實(shí)驗(yàn)器材滅→接種→消毒→實(shí)驗(yàn)臺(tái)衛(wèi)生→培養(yǎng)室培養(yǎng)
1、,更換實(shí)驗(yàn)服、帽子與鞋子,進(jìn)入接種室。
2、打開(kāi)工作臺(tái)和操作室的紫外燈,照射40min左右,后關(guān)閉。
3、開(kāi)啟過(guò)濾室風(fēng)機(jī),使風(fēng)吹拂工作臺(tái)面和四周的臺(tái)壁。
4、用70%-75%的酒精擦拭工作臺(tái)和雙手。
5、用沾有70%-75%的酒精的紗布擦拭盛培養(yǎng)基的培養(yǎng)器皿,放進(jìn)工作臺(tái)。
6、把解剖刀、剪刀、鑷子等器械浸泡在95%的酒精中,再在火焰上消毒,放在器械架上。
7、在酒精燈火焰附近切割備用的接種材料。
8、打開(kāi)瓶口,用火焰燒瓶口,轉(zhuǎn)動(dòng)瓶口使瓶口部分都燒到。
9、取下接種器械,在火焰上消毒。
10、把培養(yǎng)材料放入培養(yǎng)瓶,蓋上瓶口。
11、接種結(jié)束后,清理和關(guān)閉工作臺(tái)。
注意:操作期間應(yīng)經(jīng)常用70%-75%的酒精擦拭工作臺(tái)和雙手,接種器械應(yīng)反復(fù)在95%的酒精中浸泡和在火焰上。
以上設(shè)備清單僅供大家參考,具體配置需根據(jù)各位老師、使用者的實(shí)際需求策劃。下次我們會(huì)為大家介紹動(dòng)物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常用儀器清單及相關(guān)注意事項(xiàng),希望東南儀誠(chéng)的分享能對(duì)大家有所幫助。